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  • 2019

    12-11

    ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。实验显示,ELISA试剂盒经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物...

  • 2019

    12-11

    无论新人还是熟手,细胞污染都是必须要面对的,那对于细胞污染,我觉得zui好的措施就是预防为主,因为细胞一旦污染,想救是非常困难的,即便救活,细胞状态也会差很多。所以我先来说下我是怎么预防细胞污染的。生物安全柜是处理细胞的主要场所,也是细胞发生污染的主要场所,所以安全柜的正确使用是预防细胞污染的di一步。那么安全柜内需要注意的小细节有哪些呢?首先,所有进入安全柜的东西在进入前都要用75%的酒精消毒。特别要注意的是我们的手,只要出了安全柜,再进入安全柜前都要喷75%的酒精消毒。实...

  • 2019

    12-5

    一、肉眼观察以下几项:1.细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2.培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3.培养基澄清度:如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染几率非常大。二、进行显微镜下观察(通常观察前需先静置细胞1-2h)显微镜下可以清晰观察到细胞是否有菌类污染,菌类污染通常分为杆菌、球菌和...

  • 2019

    11-19

    干粉培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。干粉培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。干粉培养基若...

  • 2019

    11-18

    根据宾夕法尼亚大学佩雷​​尔曼开元旗牌的一项新研究,随着细胞老化,它们排出有害垃圾的能力下降。研究结果表明,老年神经元中自噬的恶化-从未复制过的细胞和它们所居住的尸体一样古老-可能是一系列神经退行性疾病(如肌萎缩侧索硬化症,阿尔茨开元旗牌氏症)的危险因素,和帕金森氏症。使用来自年轻和老年小鼠的神经元的活细胞成像,生理学教授ErikaHolzbaur博士和作者,Holzbaur实验室的博士后研究员AndreaStavoe博士本周在eLife上发表了他们的研究。自噬的重要性在2016年...

  • 2019

    10-31

    酶联免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以简单地回答样本中有多少蛋白质/多肽/抗体这一基本问题,是实验室比较常用的一种检测方法。而这种简单的分析方法的核心,就是标准曲线。没有它,我们的实验就变成了一个二元的“是/不是”测试。有了它,我们可以深入研究生物反应的细节。那么,是什么使得标准曲线如此强大呢?让我们在ELISA的背景来讨论这个问题。简单地说,标准品就是一系列已知目标蛋白数量的阳性对照。例如,如果对人类IgG进行ELISA检测,标准曲线将包含逐渐减少的已知量的人类I...

  • 2019

    10-25

    辛辛苦苦提完RNA,逆转录后一个个孔加完引物和模板,Z后进行RT-PCR,你以为这样就可以美滋滋地坐等结果了?等到一幅下面这样的结果图,不知道对于刚接触RT-PCR的你来说内心是否是崩溃的?这是啥?怎么看?别急,让我慢慢跟你介绍,看完后你就能准确的分析出你的RT-PCR结果了。「这里以7500软件为例进行介绍」1.首先设置好内参和对照组「在AnalysisSettings处」,一般我们在上机前会对应设置好的,如果设置好的话可以直接跳至第3点。如果没有设置好的话是需要重新进行设...

  • 2019

    10-14

    实验方法原理基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在Taq酶的...

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