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  • 2019

    7-24

    基础篇-无菌操作基本技术1.实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。2.无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物...

  • 2019

    7-18

    近看到不少问有关细胞培养污染的事,正好我看到了一个有关这方面的总结,很全很好很强大,跟大家分享下细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下:1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液...

  • 2019

    7-18

    生物刺激素肯定不是所谓的植物生长调节剂,植物生长调节剂也就是俗称的激素,是指人们根据植物内源激素的原理和功能进行人工合成的化学物质,当然不排除有个别企业也添加植物生长调节剂。而真正意义上的生物刺激素主要是天然物质经过提取或是分解得到的产物,对植物具有生理活性的物质,甚至有些可以直接刺激植物内源激素的形成,主要的种类有腐植酸、氨基酸、微生物、甲壳素类、海藻提取物以及其他的一些植物提取物,其中应用广泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物这三类。很多坛友会奇怪,氨基酸、腐植酸、海藻提取物...

  • 2019

    7-16

    1、荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光素技术。2、荧光的产生:物质吸收外界能量而进入激发状态,在回复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释放,即发光,这种光称为荧光。这种物质,称为荧光素。由光激发所引起的荧光,为光致荧光------荧光免疫技术由化学反应所引起的荧光,为化学荧光------化学发光技术3、荧光素的荧光特性:⑴停止供能,荧光现象随即终止⑵对光的吸收和荧光的...

  • 2019

    7-16

    一般我们购买商品化的primaryantibody的时候,抗体的说明书中都会给我们一个推荐的抗体使用浓度。这个浓度在一定程度上来说,是过饱和的,可以满足大多数实验的染色需求。但是因为是过饱和的浓度,这就带来了一定程度的抗体浪费。而过量的抗体,也会大大提高样本的自发荧光。从另一个角度来看,因为厂家给出的推荐浓度都是基于一个特定的样本浓度和样本体积,所以在一些特殊的实验中,比如样本浓度或样本体积过大的实验,推荐的浓度就无法达到饱和滴加的要求。在这样的前提下,推荐实验用户针对自己的...

  • 2019

    7-10

    1.实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。2.无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取...

  • 2019

    7-5

    MEM细胞培养基细胞培养是实验室里常见和基本的实验了,但却不是简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。经典的培养基有很多种,Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是应用广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养...

  • 2019

    7-3

    一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存1、真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中。2、采血后室温静置1小时。3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。4、取上清。分装冻存备用,2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-70℃下,可放置保存6个月。5、根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶...

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