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人子宫内膜癌细胞,Ishikawa*
原本认为该细胞来源于EnCA101细胞,但后有文献报道该细胞实际为Ishikawa细胞。
细胞名称:人子宫内膜癌细胞;ECC-1(Ishikawa)
规 格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征: 上皮细胞样
生长特性:贴壁描述
原本认为该细胞来源于EnCA101细胞,但后有文献报道该细胞实际为Ishikawa细胞。
培养条件: RPMI 1640(or MEM) 15%FBS
传代方法:1:2-1:3传代,每周换液2-3次。
STR位点信息:
STR Profile AMEL CSF1PO D13S317 D16S539 D5S818 D7S820 TH01 TPOX vWA
ECC-1(Ishikawa) X 11 12 9 12 9 10 11 9 10 9 10 8 14 17
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC
货期:1-2周
使用权限 A类
细胞用途:仅供科研使用。
方 式: 详询经理
人子宫内膜癌细胞,Ishikawa*
使用权限 A类注意事项:
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中开元旗牌摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,开元旗牌拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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